Boviene tuberkulose -teenliggaampie Elisa Kit
Model No: VD501e
Abbr.:btb ab Elisa
Monster: serum
beskrywing
Spesifikasie
Bedoelde gebruik: Die bees -tuberkulose -teenliggaampie ELISA -opsporingskit is vir die bepaling van beeste -tuberkulose
Eksemplaar: serum
Materiaal benodig, maar nie verskaf nie:
Toetsprosedures en interpretasie
Stap 1Toetsprosedure
1.1 Wasoplossing Voorbereiding
Working konsentrasie wAshing -vloeistof:Voor gebruik moet die wasoplossing tot kamertemperatuur (20-25 grade) herstel word en eweredig geskud word om dit eenvormig te maak. Verdun dan 20 keer die gekonsentreerde wasoplossing met gesuiwerde water (byvoorbeeld 5 ml gekonsentreerde wasoplossing word bygevoeg tot 95 ml gesuiwerde water), meng goed, en die verdunde wasvloeistof kan 7 dae op 2-8 grade geberg word.
1.2 Voorbereiding van monster
① Die hele dierbloed is geneem, gesentrifugeer vir 10 minute by 4000 r / min, en supernatant is versamel. Serum kan ook natuurlik sonder hemolise gekoaguleer word.
② Verdun die serummonster 1: 100 (voeg 2ul serummonster by tot 198ul monsterverdunningsmiddel) en meng deeglik.
Opmerking: negatiewe en positiewe kontroles hoef nie verdun te word nie.
1.3 Ensiem -gekonjugeerde voorbereiding
Verdun die ensiem -konjugaat 1: 200 (voeg 5ul -ensiem -konjugaat (X100) by tot 995ul monsterverdunningsmiddel) en meng deeglik.
1.4 Toetsprosedure
Neem die ensiemetiket -mikroplaat (volgens die aantal monsters, kan verskeie kere uitmekaar gehaal word en gebruik word), voeg 100ul van die verdunde serum by die ensiemetiket -mikroplaat, stel twee putte elk vir negatiewe en positiewe monsters, en voeg onderskeidelik 100ul vir negatiewe en positiewe kontroles op die reaksie op die reaksie. Skud die monster saggies in die put met behulp van die seëlplaatfilm om die plaat te bedek, en inkubeer 30 minute op 37 grade.
Maak die verseëlingplaatfilm, skud die oplossing in die plaatput, voeg 300 µl werkende konsentrasie -wasvloeistof by elke put en gooi dan die vloeistof in die put weg. Herhaal die bogenoemde stappe 5 keer, en trek uiteindelik droog op 'n skoon absorberende papier.
③add 100 µl ensiem gekonjugeer aan elke put, bedek die plaat en inkubeer 45 minute by 37 grade.
Maak die verseëlingplaatfilm, skud die oplossing in die plaatput, voeg 300 µl werkende konsentrasie -wasvloeistof by elke put en gooi dan die vloeistof in die put weg. Herhaal die bogenoemde stappe 5 keer, en trek uiteindelik droog op 'n skoon absorberende papier.
⑤Add 100μL substraatoplossing vir elke put, bedek die plaat en inkubeer vir 10 minute by 37 grade weg van die lig.
⑥Add 50 µl stopoplossing vir elke put, en bepaal die resultaat binne 5 minute.
Stap 2 Resultaat Interpretasie
Die OD450-waarde van elke put is op die 96-putjie-mikroplaatleser gelees.
2.1 Validering
Die gemiddelde OD450NM -waarde van negatiewe beheer was<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 Berekeningsmetode
Bereken die S/P soos volg vir elke monster met behulp van die gekorrigeerde monster en kontrolewaardes:
2.3 Resultaatinterpretasie
Wanneer S/P<0.25, it is judged as negative.
Wanneer S/P groter as of gelyk aan 0,30, word dit as positief beskou.
Wanneer 0,25 minder as of gelyk aan S/P<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
Warm etikette: Boviene tuberkulose -teenliggaampie Elisa Kit, China Bovine Tuberkulose -teenliggaampie Elisa Kit Verskaffers, vervaardigers, fabriek
