Voet- en mondsiektesvirus-O-teenliggaampie Elisa Kit

Spesifikasie

FMDV-O AB Elisa

Bedoelde gebruik: Die beesvoet- en mondsiekte-virus-O

Teenliggaam ELISA -opsporingskit is vir die bepaling van voet- en mond -teenliggaampie in die serum van Bovine in vitro. Die toets word gebruik om die voet- en mondsiekte -virus -tipe O -teenliggaam -immuniteitstatus van plase te bepaal.

Eksemplaar:Serum

Materiaal benodig, maar nie verskaf nie:

Gesuiwerde water

Pipet

96-put mikroplaatleser (450 nm)

Timer

Sentrifuge (4000 rpm)

Wasmasjien

Oond (37 grade)

Toetsprosedures en interpretasie

Stap 1 Toetsprosedure

1.1 Wasoplossing Voorbereiding

Working konsentrasie wAshing -vloeistof:Voor gebruik moet die wasoplossing tot kamertemperatuur (20-25 grade) herstel word en eweredig geskud word om dit eenvormig te maak. Verdun dan 20 keer die gekonsentreerde wasoplossing met gesuiwerde water (byvoorbeeld 5 ml gekonsentreerde wasoplossing word bygevoeg tot 95 ml gesuiwerde water), meng goed, en die verdunde wasvloeistof kan 7 dae op 2-8 grade geberg word.

1.2 Voorbereiding van monster

① Die hele dierbloed is geneem, gesentrifugeer vir 10 minute by 4000 r / min, en supernatant is versamel. Serum kan ook natuurlik sonder hemolise gekoaguleer word.

② Verdun die serummonster 1:25 (voeg 5ul serummonster by tot 120ul monsterverdunningsmiddel) en meng deeglik.

Opmerking: negatiewe en positiewe kontroles moet ook verdun.

1.3 Ensiem -gekonjugeerde voorbereiding

Verdun die ensiem -konjugaat 1:90 (voeg 5ul -ensiem -konjugaat (X100) by tot 445ul -monsterverdunningsmiddel) en meng deeglik.

1.4 Toetsprosedure

Neem die ensiemetiket -mikroplaat (volgens die aantal monsters, kan verskeie kere uitmekaar gehaal word en gebruik word), voeg 100ul van die verdunde serum by die ensiemetiket -mikroplaat, stel twee putte elk vir negatiewe en positiewe monsters, en voeg onderskeidelik 100ul vir negatiewe en positiewe kontroles op die reaksie op die reaksie. Skud die monster saggies in die put met behulp van die seëlplaatfilm om die plaat te bedek, en inkubeer 30 minute op 37 grade.

Maak die verseëlingplaatfilm, skud die oplossing in die plaatput, voeg 300 µl werkende konsentrasie -wasvloeistof by elke put en gooi dan die vloeistof in die put weg. Herhaal die bogenoemde stappe 5 keer, en trek uiteindelik droog op 'n skoon absorberende papier.

③add 100 µl ensiem gekonjugeer aan elke put, bedek die plaat en inkubeer 45 minute by 37 grade.

Maak die verseëlingplaatfilm, skud die oplossing in die plaatput, voeg 300 µl werkende konsentrasie -wasvloeistof by elke put en gooi dan die vloeistof in die put weg. Herhaal die bogenoemde stappe 5 keer, en trek uiteindelik droog op 'n skoon absorberende papier.

⑤Add 100μL substraatoplossing vir elke put, bedek die plaat en inkubeer vir 10 minute by 37 grade weg van die lig.

⑥Add 50 µl stopoplossing vir elke put, en bepaal die resultaat binne 5 minute.

Stap 2 Resultaat Interpretasie

Die OD450-waarde van elke put is op die 96-putjie-mikroplaatleser gelees.

2.1 Validering

Die gemiddelde OD450NM -waarde van negatiewe beheer was<0.15 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Berekeningsmetode

Bereken die S/P soos volg vir elke monster met behulp van die gekorrigeerde monster en kontrolewaardes:

2.3 Resultaatinterpretasie

Wanneer S/P<0.15, it is judged as negative.

Wanneer S/P groter as of gelyk aan 0,25, word dit as positief beskou.

Wanneer 0,15 minder as of gelyk aan S/P<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

Warm etikette: Voet- en mondsiektesvirus-O-teenliggaampie Elisa-kit, China Foot- en Mouth Disease-virus-O-teenliggaam ELISA Kit Verskaffers, vervaardigers, fabriek