Brucella -teenliggaampie Elisa Kit

Spesifikasie

 

Toetsprosedures en interpretasie

 

Stap 1 Toetsprosedure

1.1 Wasoplossing Voorbereiding

WOrking konsentrasie wAshing -vloeistof:Voor gebruik moet die wasoplossing herstel word tot kamertemperatuur (20-25 graad) en eweredig geskud word om dit eenvormig te maak . dan verdun 20 keer die gekonsentreerde wasoplossing met gesuiwerde water (byvoorbeeld 5 ml gekonsentreerde wasoplossing word bygevoeg tot 95 ml gesuiwerde water), meng goed vir 7 vir 7 kan gestoor word by 2-8}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}} dae .

1.2 Voorbereiding van monster

①Whole Animal Blood is geneem, 10 minute op 4000 rpm gesentrifugeer, en supernatant is versamel . serum kan ook natuurlik gekoaguleer word sonder hemolise .

② Wanneer die steekproefgrootte groot is, om te verseker dat die eksperimentele reaksietyd konsekwent is . Meng die serummonster met die teenliggaamwerkoplossing by 1: 1 in die verdunningsplaat (70ul serummonster + 70 UL -teenliggaamwerkoplossing) . die negatiewe beheer en positiewe beheer is dieselfde as die serummonster .}}}

1.3 Toetsprosedure

Neem die ensiemetiket -mikroplaat (volgens die aantal monsters, kan uitmekaar gehaal word en verskeie kere gebruik word), stel twee putte elk op vir negatiewe en positiewe kontroles, voeg 100ul van die voorste mengsel by tot die ensiemetiket mikroplaat . skud die monster saggies in die put met behulp van die verseëlplaatfilm om die plaat te dek, en in die 37 -graad in te sit, en in die 37 -graad in te sit vir 37 graad. minute .

Sit die verseëlingplaatfilm op, skud die oplossing in die plaat goed, voeg 300 µl werkende konsentrasie -wasvloeistof by elke put, en gooi dan die vloeistof in die put ., herhaal die bogenoemde stappe 5 keer, en trek uiteindelik droog op 'n skoon absorberende papier .

③Dilute ensiem konjugaat:Verdun die ensiem -konjugaat (50 ×) 50 keer (byvoorbeeld: 20ul -ensiem -gekonjugeerde konsentraat + 980 UL -verdunningsmiddel 1, die spesifieke hoeveelheid wat benodig word, word bereken volgens die aantal toetsmonsters), meng goed en stel . opsy gesit .

④add 100 µl ensiem gekonjugeer aan elke put, bedek die plaat en inkubeer 30 minute by 37 grade .

⑤ Washing Enzyme Plate, die spesifieke bewerking is dieselfde as bogenoemde ② .

⑥add 100 µl substraatoplossing vir elke put, bedek die plaat en inkubeer vir 10 minute by 37 grade weg van lig .

⑦Add 50 µl stopoplossing vir elke putjie, en bepaal die resultaat binne 5 minute .

 

Stap 2 Resultaat Interpretasie

 

Die OD450 -waarde van elke put is gelees op die 96- goed mikroplaatleser .

2.1 Validering

 

Die gemiddelde OD450NM -waarde van positiewe kontrole was <0 . 35 en die gemiddelde OD450NM -waarde van negatiewe kontrole/positiewe beheer was groter as of gelyk aan 3 . 5, die eksperimentele resultate was geldig. Andersins moet die toets herhaal word.

2.2 Berekeningsmetode

Bereken die PI (blokkering) vir elke monster soos volg met behulp van die gekorrigeerde monster en kontrolewaardes:

2.3 Resultaatinterpretasie

Wanneer Pi <20%, word dit as negatief beoordeel .

Wanneer PI> 30%, word dit as positief beoordeel .

Wanneer 20% minder as of gelyk is aan PI minder as of gelyk aan 30%, word dit as verdag beskou, en stel voor om monsterneming te herhaal en 'n week later te toets .

Warm etikette: Brucella -teenliggaampie Elisa Kit, China Brucella -teenliggaampie Elisa Kit Verskaffers, vervaardigers, fabriek